テクノロジー

CI-2500M

自動化

「職人技」を必要としない自動化技術
従来のマイクロインジェクション法において、オペレーターに高度の熟練を要求していたキャピラリー先端の位置や、吐出量の調整などの煩わしい作業を自動化しました。
これにより、誰にも簡単にマイクロインジェクションを始めることができます。

簡便性

本装置の操作は、モニター上に映し出された顕微鏡画像(細胞)のインジェクション希望箇所をワンクリックするだけで、簡単、確実にインジェックションが行えます。
C1-2500Mでは、細胞にやさしい環境下(37℃,5%CO2)で操作ができ、インジェクション直後から開始される現象をムービーで記録することができます。

定量性

厳密に導入物質の比率を調整して細胞内に物質をインジェクションできるので、定量的な発現の解析が可能となります。

多様性

遺伝子のみならず、抗体などのタンパク質やsiRNA/miRNAなどの核酸、低分子化合物などの多様な物質を、選択された細胞へ自動インジェクションが可能であり、極めて多様性に富んだ実験が可能となります。

高精度

培養細胞へ物質のインジェクションを行うには、数μmの誤差も許されません。
本装置は、構成部品の動作精度を高めるとともに、シャーレの傾きを自動補正する機能を開発、搭載し、より確実なマイクロインジェクションを実現しました。(キャピラリー位置決め精度:±0.5μm)

付着細胞を画面上で指定するワン・クリック・マイクロインジェクション

セルインジェクターCI-2000Mは、直径35mmのシャーレ上に培養した付着細胞へのマイクロインジェクションも可能です。シャーレ上の細胞の画像を制御用PCの画面に表示し、オペレーターが画面上の細胞をマウスで選択するだけで、自動的にシャーレステージ、マイクロマニピュレータを制御し、マイクロインジェクションを行います(ワン・クリック・マイクロインジェクション)。
1視野0.1mm角の細胞を9視野同時に表示し、マイクロインジェクションしたい細胞がある視野を選択することができます。これにより、対象細胞の探索を容易にし、付着細胞に対するマイクロインジェクションのスループット向上を図っています。

実施例:HEK293細胞への蛍光試薬(赤)と蛍光タンパク質(緑)の導入

セルインジェクターCI-2000Mを用いて、付着細胞(HEK293:ヒト胎児腎細胞株)へ蛍光試薬(赤)と蛍光タンパク質(緑)プラスミドを一緒にマイクロインジェクションした例です。導入率は47%、導入に成功した細胞のうち、蛍光タンパク質の発現率は34%です。

処理フロー:
  • イメージ11. 付着細胞を培養したシャーレをセット
  • イメージ12. 細胞の画像を取得
  • イメージ13. 対象細胞をマウスで選択
  • イメージ14. 自動マイクロインジェクション
  • イメージ15. シャーレ取り出し・培養
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処理スキーム

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製品情報・仕様

装置仕様

構成部品 仕 様
  CI-2000M CI-2500M
シャーレステージ X:±13mmストローク 位置決め精度:±0.5μm以下 移動速度:50μm/0.2秒
Y:±43mmストローク 位置決め精度:±0.5μm以下 移動速度:50μm/0.2秒
マニピュレータ X:130mmストローク 位置決め精度:±0.5μm以下 移動速度:50μm/0.2秒
Y:20mmストローク 位置決め精度:±0.5μm以下 移動速度:50μm/0.2秒
A:20mmストローク  移動速度:50μm/0.1秒
※高速動作時、振動なきこと
対物レンズ x40 x40 / x20
温度・CO2制御 37℃・5%
ムービー画像撮影
制御用パソコン Microsoft® Windows® XP Professional、DIO制御、アナログ制御、画像処理

外観形状

構成部品 仕 様
外形寸法(mm) 1550(W)×700(D)×1350(H)
重量(kg) 280

ユニットサイズ・重量

ユニット名 内 容 サイズ・重量
本体 マイクロインジェクション実行部 600(W)×500(D)×650(H)mm/150kg
ポンプ格納箱 圧気エアー用コンプレッサ 700(W)×320(D)×600(H)mm/20kg
制御部 本体制御部(制御用PC含む) 650(W)×700(D)×700(H)mm/100kg
制御卓
操作用モニタ、キーボード、マウス 850(W)×700(D)×700(H)mm/10kg

設置条件

項 目 条 件
設置面積(mm) 1600(W)×800(D)
床耐荷重 200kg/㎡
状態 水平
環境 環境条件に従う
その他 メンテナンスエリアとして、本装置周辺に50cmの空きスペースが必要

環境条件

項 目 使用環境 保存環境
温度 20℃~25℃ 10℃~50℃
温度勾配 10℃/hour 15℃/hour
湿度 40~70% 10~80%
塵埃 一般環境 一般環境
一時側電源 AC100V(90~110Vrms)単相 0.8KVA 48~62Hz接地端子付
エアー仕様 工場圧気不要(装置にコンプレッサ付属)
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アプリケーション

適用例 : シングル・セル・アナリシス

細胞内に導入する物質にあまり限定されない

細胞外から細胞質内に導入が困難な物質の物理的な細胞室内導入が可能
  • 抗体
  • タンパク質
  • ペプチド
  • siRNA
  • DNA vector
  • 化合物
細胞質から核内への移行が困難な物質の物理的な核内導入が可能
  • 抗体
  • タンパク質
  • ペプチド
  • siRNA
  • DNA vector
  • 化合物
  • ※核移行シグナルを持たない直径25μm以上のタンパク質は一般的に核膜孔を通過できず、核内に移行しない。
  • ※Vectorは核内インジェクションの方が発現率が高い

細胞質内、核内と部位を指定して導入可能 (導入物質:Alexa594 dextran)

細胞質内
細胞質内
核内
核内